DOÇ.DR. FİLİZ GÜREL

Bitkisel patojenlerin polimeraz zincir reaksiyonu (PCR)’a dayalı yöntemlerle genetik tiplendirmesi

Bu çalışmada farklı stratejilere dayalı PCR uygulamaları ile mikroorganizmaların genetik tiplendirmesi amaçlanmıştır. Hedef organizma olarak, ülkemizde ekonomik öneme sahip bitkilerde hastalık yapan bakteri ve mantar türleri kullanılmıştır. Bunlar Pseudomonas syringae’nin fasulye, domates ve zeytinde hastalık yapan üç patovarı ile Fusarium’un buğday ve arpada hastalık yapan Fusarium graminearum ve Fusarium culmorum ırklarıdır. Zeytin ağacında hastalık yapan Pseudomonas syringae pv. savastanoi tümörlü dallardan izole edilmiş, diğer tüm ırklar ise araştırıcılardan sağlanmıştır. Bu türlere ait ırkların genetik tiplendirmesi gerek özel gen dizilerine ve gerekse gen dışı tekrarlı dizilere (REP, ERIC ve BOX) özgü primerler kullanılarak yapıldı. Pseudomonas syringae’nin fasulye, domates ve zeytinde hastalık yapan üç patovarındaki BOX dizilerinin çoğaltımı ile her üç patovarı ayırt edici nitelikte genomik parmak izleri elde edildi. Pseudomonas syringae pv. savastanoi bakterisinin Orhangazi ve Akhisar orijinli izolatlarında çoğaltılan tüm tekrarlı dizilerde yüksek polimorfizm gözlendi. Fusarium’un ülkemiz kökenli ırkları ilk kez bu çalışmada genetik olarak tiplendirildi. Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile bu ırklar arasındaki benzerlik/farklılıkları ortaya koymada yeterli düzeyde genomik parmak izleri elde edildi. Her üç tipteki PCR (REP, ERIC, BOX) verilerinin Jaccard benzerlik indeksine göre değerlendirilmesi sonucu, Fusarium graminearum’un Sakarya orijinli iki ırkı arasında %76; F. graminearum (Sakarya ırkı) ve F. culmorum (Marmara ırkı) arasında ise %27 benzerlik olduğu belirlendi.